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      高效液相色谱常用数据处理方法的探讨

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      高效液相色谱常用数据处理方法的探讨

      发布日期:2021-11-04 作者: 点击:

      高效液相色谱常用数据处理方法的探讨

      高效液相色谱仪本身就是记录样品通过检测器时吸光度变化引起的电信号变化,从而生成色谱图,实验仪器设备结果取决于后期的色谱数据处理系统。

      对谱图进行处理后,即可制作校准曲线。校准曲线是数据处理的关键点,是将标准谱图的信息和数据变成处理样品谱图的标准。校准是通过分析指定的制备标准样品来确定计算成分浓度的响应因子的过程。接下来,介绍常用的数据处理方法:

      1.高效液相色谱外标法是指在空白样品中加入一定量的标准品制成对照样品,与未知供试品平行处理检测,根据对照样品响应值与标准样品浓度函数的关系计算未知供试品中被测成分的浓度的定量方法。

      2内标法是指在一定量的待测样品混合物中加入一定重量的纯物质作为内标,然后对含有内标的样品进行色谱分析,分别测定内标和待测组分的峰面积和相对校正因子,根据公式计算出待测组分的含量。

      3高效液相色谱两种数据处理方法的区别

      内标法是在待测样品中加入标准物质,外标法不是在待测样品中加入标准物质,而是在与待测样品相同的色谱条件下单独测定。

      1.高效液相色谱外标法对仪器的重复性要求严格,适用于大量样品的分析,因为仪器会随着使用而变化,所以需要定期校准曲线。该方法操作简单,计算方便,无需测量校正因子,适合自动分析。但必须保证仪器的重现性和操作条件的稳定性,否则会影响实验结果。

      2.内标法的要求相当严格,内标的选择要有一定的原则,适合分析样品量少的情况;不要求样品中所有成分都有峰,只要内标和有关成分有峰且分离良好即可。样品进样量和操作条件的控制不是很严格,但样品和内标必须称量准确,否则会影响实验结果。


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